氨基酸分離純化的辦法

　　氨基酸鹽析常用的中式鹽，主要有-硫-酸-銨、-硫-酸-鎂、-硫-酸-鈉、食鹽、磷酸鈉等。因?yàn)檫@個(gè)在鹽析前血清要加等量機(jī)體機(jī)能鹽水稀釋，使氨基酸含量在2.5-3.0百分之百。這個(gè)之外也可用葡糖凝膠G-25或G-50過(guò)柱的方法除鹽，所用的時(shí)間就比較短。氨基酸液體濃度：氨基酸液體濃度高時(shí)，欲離合的氨基酸每常摻雜著其它氨基酸地一塊兒沉淀出來(lái)(共沉現(xiàn)象)。鹽析時(shí)若溶液pH在氨基酸等電點(diǎn)則效果更好。普通溫度低氨基酸溶介度減低。

　　影響鹽析的因素有：溫度：除對(duì)溫度敏銳的氨基酸在低溫5度操作外這時(shí)需要使用生化培養(yǎng)箱，普通可在室溫中施行。pH值：大部分?jǐn)?shù)氨基酸在等電點(diǎn)時(shí)在濃鹽溶液中的溶介度最低。

　　氨基酸在用鹽析沉淀離合后，需將氨基酸中的鹽去掉除掉，常用的方法是透析，即把氨基酸溶液裝入秀析袋內(nèi)常用的是玻璃紙，施行透析，并不斷的改變，因透析所需時(shí)間較長(zhǎng)，所以最好在低溫中施行。因?yàn)楦鞣N氨基酸分子顆粒體積、親水程度不一樣，故鹽析所需的鹽液體濃度也不同，因?yàn)檫@個(gè)調(diào)節(jié)混合氨基酸溶液中的中式鹽液體濃度可使各種氨基酸分段沉淀。但有的氨基酸如鮮紅蛋白、肌紅蛋白、清蛋白在較高的溫度20度比0度時(shí)溶解度低，培養(yǎng)箱更容易鹽析。

　　中式鹽對(duì)氨基酸的溶解度有顯著影響，普通在低鹽液體濃度下隨著鹽液體濃度升高，氨基酸的溶解度增加，此稱鹽溶;當(dāng)鹽液體濃度接著升高時(shí)，氨基酸的溶解度不一樣程度減退并先后析出，這種現(xiàn)象稱鹽析，將數(shù)量多的鹽加到氨基酸溶液中，高液體濃度的鹽離子如-硫-酸-銨的SO4和NH4有很強(qiáng)的水合力，可奪氨基酸分子的水合層使之失水，于是氨基酸膠粒凝固并沉淀析出。那里面應(yīng)用最多的-硫-酸-銨，它的長(zhǎng)處是溫度系數(shù)小而溶解度大20度時(shí)達(dá)到最高限度溶液為4.1M，即767克/升;0度時(shí)達(dá)到最高限度溶解度為3.9M，即676克/升)，在這一溶解度范圍內(nèi)，很多氨基酸和酶都可以鹽析出來(lái);額外-硫-酸---銨分段鹽析效果也比其它鹽好，不易引動(dòng)氨基酸改變性別。-硫-酸-銨溶液的pH常在4.5-5.5之間，當(dāng)用其它pH值施行鹽析時(shí)，需用-硫-酸-或氨水調(diào)節(jié)。