暗視野顯微鏡和倒置顯微鏡的判斷

  (一)倒置顯微鏡

  在細(xì)胞培養(yǎng)、組織培養(yǎng)和微生物研究中，常用倒置顯微鏡進(jìn)行觀測，其光路原理如圖3—25所示�？吕�照明系統(tǒng)的光源(1)發(fā)出的光線經(jīng)聚光器(2)后照亮標(biāo)本(4).3為孔徑光鬧，(13)則為機(jī)場光闊。標(biāo)本經(jīng)物鏡組(5)、轉(zhuǎn)像系統(tǒng)(6，7，8，9，10，11)后成像在目鏡(12)的物方焦平面上，人眼通過目鏡組進(jìn)行觀測。為廠觀測方便，轉(zhuǎn)像系統(tǒng)的設(shè)計(jì)應(yīng)使系統(tǒng)所成的像為完全一致的像。

  照明系統(tǒng)位于載物臺(tái)(物體)之上，而物鏡組則在載物臺(tái)之下，其相對(duì)位置恰好和一般生物顯微鏡相反，“倒置”二字即內(nèi)此而得。

  (二)暗視場顯微鏡

  暗視場顯微鏡又叫做暗視野顯微鏡，它與普通明視場顯微鏡的主要區(qū)別是照明方式不同。普通顯微鏡是讓光速透過標(biāo)本后直接進(jìn)入物鏡，所以視場是明亮的，暗視場顯微鏡卻用強(qiáng)而窄的光束照射標(biāo)本，而又不讓光束直接進(jìn)人物鏡。但由于標(biāo)本中的微粒能夠散射光線，這些散射光中，有一部分能夠進(jìn)人物鏡。因此，在黑暗的背景上，能看見標(biāo)本中微粒的閃爍光點(diǎn)，好僚微粒本身在發(fā)光一樣。這道理正如一間暗室內(nèi)，從墻上的小孔射人一束強(qiáng)烈的陽光，能夠在光路上看見灰塵的存在一樣。這種現(xiàn)象，在光學(xué)上稱為丁達(dá)爾(Tyndall)現(xiàn)象。暗視場顯微鏡就是根據(jù)這一原理設(shè)計(jì)的。

  普通明視場顯微鏡，在中心照明的情況下，極限只能分辨0.2μm的細(xì)節(jié)，但暗視場顯微鏡可以分辨0.004μm以上的微粒的存在。也就是說，用普通顯微鏡看不見的微粒，利用暗視場顯微鏡可以看見。但由于暗現(xiàn)場顯微鏡是利用被檢物體表面散射的光線來觀察物體的，因此只能看到物體的外表輪廓和運(yùn)動(dòng)狀態(tài)，而不能辨認(rèn)其內(nèi)部結(jié)構(gòu)。