熒光光譜分析法概述

　　熒光是物質(zhì)吸收電磁輻射后受到激發(fā)，受激發(fā)原子或分子在去激發(fā)過程中再發(fā)射波長與激發(fā)輻射波長相同或不同的輻射。當(dāng)激發(fā)光源停止輻照試樣以后，再發(fā)射過程立刻停止，這種再發(fā)射的光稱為熒光。

　　除了紫外光和可見光可能激發(fā)熒光外，其他的光如紅外光、X射線也可能激發(fā)出熒光。這里介紹的熒光，是指物質(zhì)在吸收紫外光和可見光后發(fā)出的波長較長的紫外熒光或可見熒光。

　　熒光光譜具有高靈敏度，因?yàn)椋?/SPAN>

　�。�1）熒光輻射的波比激發(fā)光波長，測量到的熒光頻率與入射光的頻率不同。熒光在各個(gè)方向上都有發(fā)射，因此可以在與入射光成直角的方向上檢測，如此，熒光不受來自激發(fā)光的本底的干擾，靈敏度大大高于紫外一可見吸收光譜，測量用的樣品量很少，且測量方法簡便。

　�。�2）熒光光譜信息量較大。熒光光譜能提供較多的參數(shù)，例如激發(fā)譜、發(fā)射譜、峰位、峰強(qiáng)度、熒光壽命、熒光偏振度等。熒光光譜還可以檢測一些紫外一可見吸收光譜檢測不到的時(shí)間過程。紫外和可見熒光涉及的是電子能級(jí)之間的躍遷，熒光產(chǎn)生包括兩個(gè)過程—吸收以及隨之而來的發(fā)射。每個(gè)過程發(fā)生的時(shí)間與躍遷頻率的倒數(shù)為同一時(shí)間量級(jí)（10一15s），但兩個(gè)過程有時(shí)間延遲，大約為10一8s，這段時(shí)間內(nèi)分子處于激發(fā)態(tài)。激發(fā)態(tài)分子的壽命取決于輻射與非輻射的競爭。由于熒光有一定的壽命，因此可以檢測一些時(shí)間過程與其壽命相當(dāng)?shù)倪^程。例如，生色團(tuán)及其環(huán)境的變化在紫外可見吸收的10一15s的過程中基本是靜止不變的，因此無法用紫外可見吸收光譜檢測，但可以用熒光光譜檢測。

　　熒光光譜包括激發(fā)譜和發(fā)射譜兩種。激發(fā)譜是熒光物質(zhì)在不同波長的激發(fā)光作用下測得的某一波長處的熒光強(qiáng)度的變化情況，即不同波長激發(fā)光的相對效率；發(fā)射譜則是某一固定波長的激發(fā)光作用下熒光強(qiáng)度在不同波長處的分布情況，也就是熒光中不同波長光成分的相對強(qiáng)度。

　　由于激發(fā)態(tài)和基態(tài)有相似的振動(dòng)能級(jí)分布，而且從基態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí)躍遷到第一電子激發(fā)態(tài)各振動(dòng)能級(jí)的概率與由第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí)躍遷到基態(tài)各振動(dòng)能級(jí)的幾率也相近，因此吸收譜與發(fā)射譜呈鏡象對稱關(guān)系。