石磊：快速檢測方法是轉(zhuǎn)基因檢測的大方向

　　2015年4月9日“第八屆中國國際食品安全技術(shù)論壇”(以下簡稱：CBIFS 2015)在揚州市揚州會議中心開幕。論壇開幕式的當天同時舉辦了四個專題技術(shù)研討會，分別是：食品安全分析檢測技術(shù)研討會、食品安全快速檢測技術(shù)研討會、食品中微生物及毒素檢測技術(shù)研討會、農(nóng)獸藥殘留及重金屬檢測技術(shù)研討會。

　　在食品安全快速檢測技術(shù)研討會中，來自華南理工大學輕工與食品學院的石磊教授做了題為“新型快速轉(zhuǎn)基因檢測方法在食品中的應(yīng)用”的主題報告。

　　石磊在報告中首先按照檢測對象對食品轉(zhuǎn)基因方法進行了分類，一種是核酸檢測，其主要采用普通PCR、實時熒光PCR、巢氏PCR、競爭性PCR、基因芯片技術(shù);另一種是蛋白質(zhì)檢測，主要采用的是ELISA、免疫試紙條、Westem印記技術(shù)。石磊題道，國外許多政府檢測機構(gòu)都在大量使用快速檢測方法，尤其是ATP法、免疫法、阻抗法和顯色培養(yǎng)基法，這些快速檢測方法在國外應(yīng)用相當成功。國內(nèi)的許多政府檢測機構(gòu)也都已經(jīng)在使用或正在考慮使用國外先進的快速檢測技術(shù)。石磊說，從長遠發(fā)展趨勢來說，快速方法是轉(zhuǎn)基因檢測的大方向。

　　石磊在報告中介紹了目前常用的轉(zhuǎn)基因檢測方法，如膠體金免疫層析檢測條、PCR—聚合酶鏈式反應(yīng)技術(shù)、熒光PCR技術(shù)等。他說，熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)是目前主流的分子檢測技術(shù)，相關(guān)產(chǎn)品占據(jù)全球分子診斷市場的一半。然而這種技術(shù) 由于核酸檢測過程復(fù)雜、實現(xiàn)核酸擴增信號檢測設(shè)備價格高、對實驗室硬件條件要求高等問題，只局限于高端市場，普及推廣困難，基層醫(yī)療和檢測機構(gòu)需求得不到滿足。

　　基于此種現(xiàn)狀，石磊及其團隊開發(fā)了新型恒溫熒光核酸擴增分子檢測平臺。據(jù)石磊介紹說，該平臺的反應(yīng)原理是一種新型的等溫擴增技術(shù)，即等溫多自配引發(fā)擴增(IMSA)，反應(yīng)體系是具有鏈置換特性的DNA聚合酶、dNTP、適宜的緩沖液和模板DNA，能夠識別靶DNA7個特異序列的6條引物。他說，該方法特異性強，6條引物對靶序列的7個特異序列區(qū)的識別保證了IMSA擴增的高特異性;且等溫高效，IMSA在等溫條件下擴增，不會因為溫度改變而造成時間的損失，而且受非靶序列的影響小，與PCR相比，其檢測極限更小，僅為幾個拷貝。基于這些優(yōu)點，IMSA在1小時可完成檢測，核酸染料后，肉眼就可觀察結(jié)果且反應(yīng)不需PCR儀和特殊試劑。

　　石磊介紹說，IMSA技術(shù)已經(jīng)成功產(chǎn)業(yè)化。目前，一臺恒溫熒光檢測儀、搭配一臺金屬浴、一臺混勻器、一臺小型離心機及移液器和檢測試劑盒即可成為一套可移動的轉(zhuǎn)基因檢測實驗室。